TIL
Desenvolupament de teràpies TIL per aprofitar les cèl·lules immunitàries dels mateixos pacients per al tractament de tumors sòlids, combinant expansió cel·lular, producció GMP i translació clínica.
La selecció del pacient i del tumor són passos inicials crítics. Aquesta teràpia està generalment indicada per a tumors sòlids amb una infiltració immunitària significativa, com ara el melanoma o els càncers d’ovari i de pulmó. L’elegibilitat del pacient es determina per l’accessibilitat del tumor, l’estat general de salut i els antecedents de tractaments previs.
El teixit tumoral s’ha de recollir mitjançant un procediment quirúrgic en condicions estèrils i amb traçabilitat garantida. El transport de la biòpsia fins a la instal·lació de processament s’ha de fer de manera ràpida i sota condicions de temperatura controlada per preservar la viabilitat dels limfòcits. Un etiquetatge adequat i una documentació exhaustiva són essencials per complir els requisits de les Bones Pràctiques de Fabricació (GMP).
Els fragments tumorals es dissocien mitjançant mètodes enzimàtics i mecànics per alliberar els limfòcits, que posteriorment es cultiven en medis enriquits amb IL-2. L’objectiu d’aquesta fase és afavorir l’expansió de limfòcits reactius contra el tumor, tot mantenint la diversitat cel·lular i la seva funcionalitat.
Els cultius inicials de TIL s’avaluen per determinar la seva reactivitat específica contra el tumor i la seva capacitat de secreció de citocines. Les anàlisis mitjançant citometria de flux i els assaigs de citotoxicitat permeten definir la composició cel·lular, l’estat d’activació i la proporció de limfòcits T efectors i de memòria, factors que influiran en la potència del producte final.
Els TILs s’avaluen in vitro per la seva capacitat de reconèixer i destruir cèl·lules tumorals autòlogues o al·logèniques. Aquests assaigs determinen la força funcional, l’especificitat i els perfils d’alliberament de citocines que donen suport a la translació clínica.
Models preclínics validats, com ara xenoinjerts humanitzats o sistemes d’organoides, s’utilitzen per confirmar l’activitat antitumoral i la persistència dels TILs. Aquests estudis també proporcionen informació sobre possibles toxicitats i estratègies de dosificació.
Totes les dades funcionals, de seguretat i de persistència es compilen en un dossier per donar suport al Dossier de Medicament en Investigació (IMPD) i a la sol·licitud d’assaig clínic, establint les bases per a l’ús en humans.
.El REP defineix com s’expandeixen els TILs fins a dosis terapèutiques. Implica l’estimulació amb anticossos anti-CD3 i cèl·lules alimentadores en condicions GMP controlades. Les variables del procés, com la concentració de citocines, la composició del medi i la temporització, s’optimitzen per garantir escalabilitat i reproductibilitat.
S’estableixen assaigs estandarditzats per avaluar la identitat, la puresa, la potència i l’esterilitat. Aquests inclouen fenotipat basat en citometria de flux, assaigs de viabilitat i proves funcionals de potència alineades amb els requisits reguladors.
Es validen els procediments criogènics per garantir l’estabilitat dels TILs durant l’emmagatzematge i l’enviament. Això inclou l’establiment de medis de congelació, la congelació a velocitat controlada i protocols de recuperació després de la descongelació per mantenir la viabilitat i la funcionalitat del producte.
Un cop el tumor és rebut a la instal·lació GMP, es realitza una inspecció visual, la confirmació de la identitat i la documentació d’acceptació. Els sistemes de cadena de custòdia i de traçabilitat garanteixen el compliment dels estàndards GMP.
Els processos pre-REP i REP s’executen en entorns de Grau A/B mitjançant sistemes tancats per evitar la contaminació. Els TILs expandits es recullen, es renten i es formulen en un tampó d’infusió per a l’administració al pacient.
S’analitzen totes les proves de control de qualitat en procés i finals; incloent esterilitat, endotoxines, micoplasma, potència i identitat. La Persona Qualificada (QP) certifica el lot per a ús clínic després de verificar que es compleixen tots els criteris GMP i reguladors.
Totes les característiques de fabricació conformes a GMP es compilen en un dossier per donar suport al Dossier de Medicament en Investigació (IMPD) i a la sol·licitud d’assaig clínic.
Les GMP s’han abordat en altres etapes. Aquesta secció se centra en les GCP i en les interaccions amb les agències reguladores durant el procés de sol·licitud i durant la realització de l’assaig. Tota la informació relacionada amb el producte, el seu mecanisme d’acció, la seva fabricació, la població de pacients diana, el disseny de l’assaig clínic, com es tractaran i es farà el seguiment dels pacients, la mitigació de toxicitats, la recollida de dades i l’anàlisi ha d’incloure’s a l’IMPD que es presentarà a les autoritats reguladores.
És crucial que els desenvolupadors construeixin una comprensió sòlida de la població diana en l’àrea de la malaltia escollida, mitjançant discussions amb investigadors clínics a nivell local i internacional. En alguns casos, els grups de defensa de pacients o les organitzacions específiques de la malaltia també estan interessats a participar i poden oferir assessorament i dades, de vegades de molt alta qualitat. És important comprendre la demografia dels pacients, els tractaments previs que poden haver rebut i altres opcions que poden estar disponibles per a ells. El disseny de l’assaig ha de determinar la població de pacients diana.
El disseny del primer assaig ha de determinar la seguretat del producte, la dosi òptima i, idealment, proporcionar senyals inicials d’eficàcia. Per tant, s’han de definir adequadament els objectius primaris i secundaris. Els assaigs posteriors avaluaran més a fons l’eficàcia i poden incloure un grup control que rebi l’estàndard de cura. L’assaig final (pivot) generarà les dades necessàries per a l’autorització de comercialització.
L’execució d’un assaig clínic és una tasca complexa que requereix expertesa i aportacions en múltiples àmbits. També és una activitat costosa i que consumeix molt temps. Es necessiten múltiples actors en cada etapa i una coordinació precisa.
Aplicació de CAR-T en oncologia
Desenvolupament de teràpies gèniques
CAR-T en malalties inflamatòries
CAR-NK
